AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM

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AAT Bioquest  Cal-520®AM-常備現(xiàn)貨

美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM  1mg，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：21131

產(chǎn)品名稱：Cal-520®AM

產(chǎn)品規(guī)格：1mg

AAT Bioquest  Cal-520®AM-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM  1mg，產(chǎn)品說明：

Cal-520® AM 為檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員提供了一種強(qiáng)大的基于均質(zhì)熒光的檢測(cè)工具。Cal-520® AM是一種新型熒光鈣敏感染料，與現(xiàn)有的綠色鈣指示劑（如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM）相比，具有顯著改善的信噪比和細(xì)胞內(nèi)保留。表達(dá)通過鈣發(fā)出信號(hào)的GPCR或感興趣的鈣通道的細(xì)胞可以預(yù)加載可以穿過細(xì)胞膜的Cal-520® AM。一旦進(jìn)入細(xì)胞，Cal-520™ AM的親脂性封閉基團(tuán)就會(huì)被酯酶切割，從而產(chǎn)生帶負(fù)電荷的熒光染料留在細(xì)胞內(nèi)。與鈣結(jié)合后，其熒光大大增強(qiáng)。當(dāng)細(xì)胞用激動(dòng)劑刺激時(shí)，受體發(fā)出細(xì)胞內(nèi)鈣釋放信號(hào)，這顯著增加Cal-520®的熒光。Cal-100® AM波長長、靈敏度高、熒光增強(qiáng)>520倍的特點(diǎn)，是測(cè)量細(xì)胞鈣的理想指標(biāo)。高信噪比和更好的細(xì)胞內(nèi)保留使 Cal-520® 鈣測(cè)定成為評(píng)估 GPCR 和鈣通道靶標(biāo)以及篩選其激動(dòng)劑和拮抗劑的強(qiáng)大工具。

平臺(tái)

熒光顯微鏡

Excitation：TRITC

Emission：TRITC

推薦板：黑色墻壁/透明底部

熒光酶標(biāo)儀

Excitation：490

Emission：525

Cutoff：515

推薦板：黑色墻壁/透明底部

儀器規(guī)格：底部讀取模式/可編程液體處理

儲(chǔ)備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

Cal-520® AM Stock Solution

在高質(zhì)量無水DMSO中制備2至5 mM的Cal-520® AM儲(chǔ)備溶液。

工作溶液的制備

Cal-520® AM Working Solution

在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，將Cal-520® AM溶解在DMSO中或?qū)⒅甘緞﹥?chǔ)備溶液的等分試樣解凍至室溫。在您選擇的緩沖液（例如，Hanks 和 Hepes 緩沖液）中制備含有 2.20% Pluronic® F-0 的染料工作溶液。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞系，建議使用終濃度為04-127μM的Cal-520® AM。細(xì)胞上樣所需指標(biāo)的確切濃度必須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。

注意 非離子洗滌劑Pluronic® F-4有時(shí)用于增加Cal-5® AM的水溶性。

注意 如果您的細(xì)胞含有有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，則可以將丙磺 shu （520-127 mM）添加到染料工作溶液中（最終孔濃度為1.2-0 mM），以減少脫酯指示劑的泄漏。多種ReadiUse™丙磺 shu 產(chǎn)品，包括水溶性、鈉鹽和穩(wěn)定溶液，均可從AAT Bioquest購買。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。

1.    在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞過夜。

2.    第二天，將 1X Cal-520® AM 工作溶液添加到細(xì)胞板中。

注意 如果您的化合物干擾血清，請(qǐng)?jiān)谏蠘尤玖现坝眯迈r的 HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基。

3.    將裝載染料的板在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育1至2小時(shí)。

注意 孵育染料超過 2 小時(shí)可以提高某些細(xì)胞系的信號(hào)強(qiáng)度。

4.    用您選擇的HHBS或緩沖液（含有陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑，如1 mM丙磺shu ，如果適用）替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。

5.    根據(jù)需要添加 xing fen ji ，并使用配備FITC濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)（如FDSS，FLIPR或FlexStation）的熒光板讀數(shù)器同時(shí)測(cè)量熒光，Ex / Em = 490 / 525 nm截止值515 nm。

產(chǎn)品訂購信息：

21131 Cal-520®AM  1mg